Giới thiệu
Điện di trên gel là một kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử, được sử dụng rộng rãi để tách protein, axit nucleic và các đại phân tử khác. Việc kiểm soát đúng thể tích mẫu, điện áp và thời gian điện di là rất quan trọng để đạt được kết quả chính xác và có thể lặp lại.Đồng nghiệp trong phòng thí nghiệm của chúng tôi cung cấpthực hành tốt nhất để quản lý các thông số này trong quá trình điện di trên gel SDS-PAGE.
Sản phẩm điện di gel công nghệ sinh học Liuyi Bắc Kinh
Khối lượng mẫu: Đảm bảo tính nhất quán
Khi thực hiện điện di SDS-PAGE, thể tích mẫu là yếu tố chính có thể tác động đáng kể đến độ phân giải của kết quả. Thông thường nên nạp 10 µL protein tổng số vào mỗi giếng. Để đảm bảo tính nhất quán và ngăn chặn sự khuếch tán mẫu giữa các giếng liền kề, điều quan trọng là phải nạp một thể tích bằng nhau của dung dịch đệm tải 1x vào bất kỳ giếng trống nào. Biện pháp phòng ngừa này giúp ngăn ngừa sự lây lan của mẫu sang các làn lân cận, điều này có thể xảy ra nếu giếng bị bỏ trống.
Trước khi nạp mẫu, hãy luôn bắt đầu bằng cách thêm vật đánh dấu trọng lượng phân tử vào một giếng. Điều này cho phép dễ dàng xác định kích thước protein sau khi điện di.
Kiểm soát điện áp: Cân bằng tốc độ và độ phân giải
Điện áp được áp dụng trong quá trình điện di ảnh hưởng trực tiếp đến cả tốc độ mẫu di chuyển qua gel và độ phân giải của quá trình phân tách. Đối với SDS-PAGE, nên bắt đầu với điện áp thấp khoảng 80V. Điện áp thấp ban đầu này cho phép các mẫu di chuyển chậm và đồng đều, tập trung chúng thành một dải sắc nét khi chúng đi vào gel tách.
Khi các mẫu đã vào hoàn toàn gel tách, điện áp có thể tăng lên 120V. Điện áp cao hơn này làm tăng tốc quá trình di chuyển, đảm bảo rằng các protein được phân tách hiệu quả theo trọng lượng phân tử của chúng. Điều cần thiết là phải theo dõi tiến trình của mặt trước thuốc nhuộm xanh bromophenol, điều này cho thấy quá trình điện di đã hoàn thành. Đối với gel có nồng độ 10-12%, thông thường 80-90 phút là đủ; tuy nhiên, đối với gel 15%, bạn có thể cần kéo dài thời gian chạy một chút.
Quản lý thời gian: Biết khi nào nên dừng
Thời gian là một yếu tố quan trọng khác trong điện di trên gel. Chạy gel trong thời gian quá dài hoặc quá ngắn có thể dẫn đến sự phân tách dưới mức tối ưu. Sự di chuyển của thuốc nhuộm xanh bromophenol là một chỉ báo hữu ích: khi nó chạm tới đáy gel thì thường là lúc dừng quá trình chạy. Đối với gel tiêu chuẩn, chẳng hạn như 10-12%, thời gian điện di khoảng 80-90 phút thường là đủ. Đối với phần trăm gel cao hơn, như 15%, thời gian chạy nên được kéo dài để đảm bảo phân tách hoàn toàn protein.
Quản lý bộ đệm: Tái sử dụng và chuẩn bị bộ đệm
Đệm điện di có thể được tái sử dụng 1-2 lần, tùy thuộc vào điều kiện cụ thể của phòng thí nghiệm. Tuy nhiên, để có kết quả tối ưu, nên chuẩn bị dung dịch đệm 10x mới và pha loãng ngay trước khi sử dụng. Điều này đảm bảo rằng bộ đệm duy trì hiệu quả của nó, dẫn đến kết quả điện di đáng tin cậy hơn.
Sản phẩm điện di gel công nghệ sinh học Liuyi Bắc Kinh
Bằng cách kiểm soát cẩn thận thể tích mẫu, điện áp và thời gian điện di, bạn có thể cải thiện đáng kể độ chính xác và độ tái lập của kết quả điện di trên gel. Việc triển khai các phương pháp thực hành tốt nhất này trong công việc trong phòng thí nghiệm sẽ giúp bạn đạt được các dải rõ ràng và khác biệt hơn, dẫn đến dữ liệu tốt hơn cho phân tích tiếp theo.
Nếu bạn có nhiều phương pháp tốt hơn để tối ưu hóa thí nghiệm điện di trên gel, vui lòng thảo luận với chúng tôi!
Công ty TNHH Công nghệ sinh học Liuyi Bắc Kinh (Công nghệ sinh học Liuyi) chuyên sản xuất các thiết bị điện di trong hơn 50 năm với đội ngũ kỹ thuật chuyên nghiệp và trung tâm R&D của chúng tôi. Chúng tôi có dây chuyền sản xuất đáng tin cậy và hoàn chỉnh từ thiết kế đến kiểm tra, kho bãi cũng như hỗ trợ tiếp thị. Các sản phẩm chính của chúng tôi là Tế bào điện di (bể/buồng), Bộ nguồn điện di, Bộ chuyển đổi đèn LED xanh, Bộ chuyển đổi tia cực tím, Hệ thống phân tích & hình ảnh gel, v.v. Chúng tôi cũng cung cấp các dụng cụ phòng thí nghiệm như dụng cụ PCR, máy trộn xoáy và máy ly tâm cho phòng thí nghiệm.
Nếu bạn có bất kỳ kế hoạch mua hàng nào cho sản phẩm của chúng tôi, vui lòng liên hệ với chúng tôi. Bạn có thể gửi tin nhắn cho chúng tôi qua email[email được bảo vệ]hoặc[email được bảo vệ], hoặc vui lòng gọi cho chúng tôi theo số +86 15810650221 hoặc thêm Whatsapp +86 15810650221 hoặc Wechat: 15810650221.
Vui lòng quét mã QR để thêm vào Whatsapp hoặc WeChat.
Thời gian đăng: 20-08-2024