Điện di trên gel là một trong những phương pháp chính được sử dụng trong sinh học phân tử để phân tích DNA. Phương pháp này liên quan đến việc di chuyển các đoạn DNA qua gel, nơi chúng được phân tách dựa trên kích thước hoặc hình dạng. Tuy nhiên, bạn đã bao giờ gặp phải bất kỳ lỗi nào trong quá trình thí nghiệm điện di của mình, chẳng hạn như các dải bị lem trên gel agarose hoặc không có dải trên gel? Điều gì có thể là nguyên nhân của những lỗi này?
Kỹ thuật viên của chúng tôi đã tóm tắt một số cách khắc phục sự cố tại đây để bạn tham khảo.
1. Vết bôi trên gel agarose
●DNA đã bị thoái hóa. Tránh nhiễm bẩn nuclease.
● Đệm điện di không còn mới. Sau khi sử dụng nhiều lần đệm điện di, cường độ ion giảm và giá trị pH của nó tăng lên, do đó dung lượng đệm yếu đi, ảnh hưởng đến hiệu ứng điện di. Nên thay đệm điện di thường xuyên.
● Sử dụng điều kiện điện di không đúng. Không cho phép điện áp vượt quá 20 V/cm và duy trì nhiệt độ <30° C trong quá trình điện di. Đối với điện di sợi DNA khổng lồ, nhiệt độ phải <15° C. Kiểm tra đệm điện di có đủ dung lượng đệm hay không.
● Quá nhiều DNA được nạp vào gel. Giảm số lượng DNA.
● Quá nhiều muối trong DNA. Sử dụng kết tủa ethanol để loại bỏ lượng muối dư thừa trước.
● DNA bị nhiễm protein. Sử dụng chiết xuất phenol để loại bỏ protein nâng cao.
● DNA bị biến tính. Không làm nóng trước khi điện di. Pha loãng DNA trong dung dịch đệm bằng NaCl 20 mM.
2. Di chuyển dải DNA bất thường
● Phục hồi vị trí COS của mảnh λHind III. Đun nóng DNA trong 5 phút ở nhiệt độ 65°C trước khi điện di, sau đó làm nguội trên khối đá trong 5 phút.
● Sử dụng điều kiện điện di không đúng. Không cho phép điện áp vượt quá 20 V/cm và duy trì nhiệt độ <30° C trong quá trình điện di. Kiểm tra đệm điện di có đủ dung lượng đệm hay không.
● DNA bị biến tính. Không làm nóng trước khi điện di. Pha loãng DNA trong dung dịch đệm bằng NaCl 20 mM.
3. Dải DNA mờ hoặc không có trên gel agarose
● Số lượng hoặc nồng độ DNA nạp vào gel không đủ. Tăng số lượng DNA. Điện di trên gel polyacrylamide nhạy hơn một chút so với điện di trên agarose và lượng mẫu có thể giảm một cách thích hợp.
● DNA đã bị phân hủy. Tránh nhiễm bẩn nuclease.
● DNA được điện di khỏi gel. Điện di gel trong thời gian ngắn hơn, sử dụng điện áp thấp hơn hoặc sử dụng phần trăm gel cao hơn.
● Nguồn sáng W không phù hợp được sử dụng để hiển thị DNA nhuộm ethidium bromide. Sử dụng ánh sáng W có bước sóng ngắn (254 nm) để có độ nhạy cao hơn.
4. Thiếu dải DNA
●DNA kích thước nhỏ được điện di khỏi gel. Điện di gel trong thời gian ngắn hơn, sử dụng điện áp thấp hơn hoặc sử dụng gel có phần trăm cao hơn.
● Khó phân biệt các dải DNA có phân tử tương tự nhau. Tăng thời gian điện di và kiểm tra nồng độcủa gel để đảm bảo chính xác phần trăm gel được sử dụng.
● DNA bị biến tính. Không làm nóng trước khi điện di. Pha loãng DNA trong dung dịch đệm bằng NaCl 20 mM.
● Các sợi DNA có kích thước lớn nên phương pháp điện di trên gel thông thường là không phù hợp. Phân tích trên điện di gel xung.Bạn gặp vấn đề gì khác với điện di trên gel agarose? Chúng tôi sẽ nghiên cứu thêm để có hướng dẫn trong tương lai.
Công ty TNHH công nghệ sinh học Liuyi Bắc Kinh (Liuyi Biotech) là một công ty chuyên tập trung vào các sản phẩm liên quan đến điện di ở Trung Quốc. Câu chuyện bắt đầu từ năm 1970 khi Trung Quốc chưa bước vào thời kỳ cải cách mở cửa. Qua nhiều năm phát triển, Liuyi Bitotech đã có thương hiệu riêng, được gọi là Thương hiệu Liuyi trên thị trường nội địa cho các sản phẩm điện di.
Thương hiệu Liuyi có lịch sử hơn 50 năm tại Trung Quốc và công ty có thể cung cấp các sản phẩm ổn định và chất lượng cao trên toàn thế giới. Qua nhiều năm phát triển, nó xứng đáng với sự lựa chọn của bạn!
Các tế bào điện di ngang (bể/buồng) của Liuyi Biotech có chất lượng cao, hình thức đẹp. Với các kích cỡ khác nhau của khay gel, chúng có thể đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm khác nhau của bạn. Chúng tôi có đội ngũ kỹ thuật và nhà máy riêng. Từ thiết kế đến sản xuất, nguyên liệu thô đến các bộ phận chính, chúng tôi có thể kiểm soát toàn bộ quá trình. Dòng DYCP 31 dành cho điện di DNA, là mô hìnhDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, VàDYCP-31E. Sự khác biệt giữa chúng là kích cỡ gel và giá cả. Chúng tôi cung cấp đầy đủ kích thước sản phẩm cho khách hàng. mô hìnhDYCP-32Ccó thể tạo ra gel lớn nhất 250mm * 250mm.
Trong khi đó, chúng tôi khuyên bạn nên cung cấp năng lượng điện diDYY-6C,DYY-6DVàDYY-10Cdành cho các tế bào điện di (bể/buồng) dòng DYCP-31 và 32 của chúng tôi.
Nếu bạn muốn biết thêm thông tin về sản phẩm, vui lòng truy cập trang web này để biết thêm thông tin và vui lòng liên hệ với chúng tôi qua email để cho chúng tôi biết bạn muốn gì và xem liệu chúng tôi có thể cung cấp giải pháp cho bạn hay không.
Để biết thêm thông tin về chúng tôi, vui lòng liên hệ với chúng tôi qua email[email được bảo vệ], [email được bảo vệ].
Thời gian đăng: May-09-2022