Chuẩn bị mẫu vàĐang tải
Do sử dụng hệ thống đệm liên tục mà không cần xếp chồng gel trong hầu hết các trường hợp nên mẫu phải có nồng độ thích hợp và thể tích nhỏ. Sử dụng mộtpipetthêm từ từ mẫu, với 5-10 μg mỗi giếng, để tránh giảm độ phân giải đáng kể. Khitải mẫu, nguồn điện phải được tắt. Mẫu phải chứa thuốc nhuộm chỉ thị (0,025% bromophenol xanh hoặc cam) và sucrose (10-15%) hoặc glycerol (5-10%) để tăng mật độ, cô đặc mẫu và ngăn chặn sự khuếch tán. Tuy nhiên, đôi khi sucrose hoặc glycerol có thể tạo ra các dải hình chữ U trong kết quả điện di, điều này có thể tránh được bằng cách sử dụng 2,5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).
Điện di
Điện áp cho điện di là 5-15 V/cm, thường khoảng 10 V/cm. Để tách các phân tử lớn, điện áp phải thấp hơn, thường không vượt quá 5 V/cm.
Nhuộm
Thuốc nhuộm huỳnh quang ethidium bromide (EB) thường được sử dụng để nhuộm màu để quan sát các dải DNA trong gel agarose. EB có thể chèn vào giữa các cặp phân tử DNA cơ bản, khiến EB liên kết với DNA. Sự hấp thụ ánh sáng cực tím 260 nm của DNA được chuyển sang EB và EB liên kết phát ra huỳnh quang ở bước sóng 590 nm trong vùng màu đỏ cam của quang phổ ánh sáng khả kiến. Nhuộm gel trong dung dịch MgSO4 1 mmol/L trong 1 giờ có thể làm giảm huỳnh quang nền do EB không liên kết gây ra, tạo điều kiện thuận lợi cho việc phát hiện một lượng nhỏ DNA.
Thuốc nhuộm EB có một số ưu điểm: dễ sử dụng, không phá vỡ axit nucleic, có độ nhạy cao và có thể nhuộm cả DNA và RNA. EB có thể được thêm vào mẫu và được theo dõi bằng cách sử dụng khả năng hấp thụ tia cực tím bất cứ lúc nào. Sau khi nhuộm, EB có thể được loại bỏ bằng cách chiết với n-butanol.
Tuy nhiên, thuốc nhuộm EB là một chất gây đột biến mạnh và cần thực hiện các biện pháp phòng ngừa, chẳng hạn như đeo găng tay polyetylen trong quá trình xử lý. Acridine cam cũng là một loại thuốc nhuộm được sử dụng phổ biến vì nó có thể phân biệt giữa axit nucleic mạch đơn và mạch kép (DNA, RNA). Nó thể hiện huỳnh quang màu xanh lá cây (530 nm) đối với axit nucleic sợi đôi và huỳnh quang màu đỏ (640 nm) đối với axit nucleic sợi đơn. Ngoài ra, các thuốc nhuộm khác như xanh methylene, xanh methylene và quinoline B có thể được sử dụng để nhuộm màu.
Công ty TNHH Công nghệ sinh học Liuyi Bắc Kinh (Công nghệ sinh học Liuyi) chuyên sản xuất các thiết bị điện di trong hơn 50 năm với đội ngũ kỹ thuật chuyên nghiệp và trung tâm R&D của chúng tôi. Chúng tôi có dây chuyền sản xuất đáng tin cậy và hoàn chỉnh từ thiết kế đến kiểm tra, kho bãi cũng như hỗ trợ tiếp thị. Các sản phẩm chính của chúng tôi là Tế bào điện di (bể/buồng), Bộ nguồn điện di, Bộ chuyển đổi đèn LED xanh, Bộ chuyển đổi tia cực tím, Hệ thống phân tích & hình ảnh gel, v.v.
Chúng tôi hiện đang tìm kiếm đối tác, cả bể điện di OEM và nhà phân phối đều được hoan nghênh.
Nếu bạn có bất kỳ kế hoạch mua hàng nào cho sản phẩm của chúng tôi, vui lòng liên hệ với chúng tôi. Bạn có thể gửi tin nhắn cho chúng tôi qua email[email được bảo vệ]hoặc[email được bảo vệ], hoặc vui lòng gọi cho chúng tôi theo số +86 15810650221 hoặc thêm Whatsapp +86 15810650221 hoặc Wechat: 15810650221.
Vui lòng quét mã QR để thêm vào Whatsapp hoặc WeChat.
Thời gian đăng: 20-12-2023